Stadler B. M.
Institut für Immunologie und Allergologie, Inselspital, Bern
Duration: 3 years End of the Project: 1995
Background and Aim
Die Methodik der Repertoir Klonierung erlaubt es heute, praktisch jede denkbare Antikörperspezifität in vitro herzustellen. Auf der Oberfläche von filamentösen Phagen werden die variablen Immunglobulin-Ketten zur Expression gebracht, wodurch “Phaben” entstehen, d.h. Phagen, die Fab Antikörper Moleküle tragen. Auf diese Art können Antikörper-Genbanken hergetellt werden, die 107 bis 108 verschiedene Spezifitäten enthalten.
Über das Antigen können die spezifische Phagen isoliert werden, um so oligoklonale oder monoklonale Antikörper zu erhalten. Es ist denkbar, dass diese Methodik die traditionelle in vivo Antikörperproduktion oder die Hybridomatechnik ablösen wird, um Antikörper für die Diagnostik oder die Therapie herzustellen.
Method and Results
In diesem Projekt konnte der Nachweis erbracht werden, dass es möglich ist, direkt aus dem menschlichen Repertoire Immunglobuline zu klonieren und diese auf der Oberfläche von Phagen zu exprimieren. Aus der Vielzahl der entstandenen menschlichen Antikörper war es möglich, Autoantikörper und Antikörper gegen bekannte Immunogene zu isolieren. Die Technologie wurde für das Labor des Projektleiters einerseits zur Routine, andererseits zu einer wichtigen Grundlage auf der jetzt verschiedene andere Projekte basieren.
References
1. Vogel M., Miescher S., Biaggi C., Stadler B. M. (1994) Human anti-IgE antibodies by repertoire cloning. Eur. J. Immunol. 24, 1200-1207.
2. Lang A. B., Vogel M., Viret J.F. and Stadler B.M. (1995) Polyclonal preparations of anti-tetanus toxoid antibodies derived from a combinatorial library confer protection, Biotechnology 13, 683-685, 1995.
3. Vogel M., Miescher S., Kuhn S., Zurcher A.W., Stadler B.M. (2000) Mimicry of human IgE epitopes by anti-idiotypic antibodies. J Mol Biol 298, 729-35.
4. Vogel M., Tschopp C., Bobrzynski T., Fux M., Stadler B.M. (2004) A highly conserved interspecies V(H) in the human genome. J Mol Biol 341, 477-89.